纯氟油（yóu）Fluo-Oil 135(氟（fú）油3M Novec HFE7500电子氟化液的替代品)

Fluo-Oil 135（简称FO135） 是一种纯氟化油，可用（yòng）于替换氟油3M Novec HFE7500电子氟化液（yè）。 Fluo-Oil 135氟油的化学和物理化学性质与3M Novec HFE7500 相（xiàng）似（sì），如下表所示（shì）:

优势

生物相容性、可重（chóng）复性和稳定性。

如何（hé）使（shǐ）用？

氟（fú）油Fluo-Oil 135用于稀释FluoSurf Neat表面活性（xìng）剂或已经用Fluo-Oil 135油稀（xī）释的表（biǎo）面活性剂。

（由于FluoSurf Neat表（biǎo）面活（huó）性剂是一种（zhǒng）PFPE-PEG结构（gòu）的复杂（zá）高效纯表面（miàn）活性（xìng）剂，因为类（lèi）似于PFPE-PEG结构（gòu）的纯表面活性剂如FluoSurf Neat，Surf-Drop，PFPE-PEG-PFPE两（liǎng）嵌（qiàn）段或三嵌段表面活性剂（jì），Surf 含氟表面活性剂等，基本上都可以使用纯氟油Fluo-Oil 135进行稀释（shì）。稀释（shì）的（de）浓度从0.2%到（dào）12%之间。）

保存

室温下避（bì）光保存

安全（quán）注意事项

● 避（bì）免吸（xī）入、摄入和接触皮肤和眼（yǎn）睛

● 穿戴耐化学（xué）腐蚀的个人防护装备

● 戴上合适的手套

● 穿合适的防护服

● 戴侧护罩的安全眼镜

与3M HFE7500油产（chǎn）生液滴性（xìng）能的测试比较

分（fèn）别用3M HFE7500和Fluo-Oil 135氟化（huà）油稀释FluoSurf neat表（biǎo）面活性剂，得到4w/w%的质量浓度（dù）。

水滴产生（shēng）或油包水液滴产生的（de）两（liǎng）相流速（sù）：

油相流速为300μL/hr，水相流（liú）速为100μL/hr。

水相为PBS溶液（yè）或100μM荧光素的PBS溶液（yè）（用于测试液（yè）滴（dī）的（de）泄露）

倒置显（xiǎn）微镜观察和Image J软（ruǎn）件分析。

一、液（yè）滴尺寸及其（qí）分布

在Fluo-Oil 135和HFE7500油中，产生（shēng）相似尺寸的水滴。在既定流速参数（shù）下，液滴的平（píng）均（jun1）直径（jìng）为110μm。液滴尺寸的（de）CV分别为2.3%（Fluo-Oil 135油）和2.9%（HFE7500油）。

二、液（yè）滴稳（wěn）定性

大多数研究团队使用（yòng）液滴微流体（tǐ）进（jìn）行细（xì）胞封（fēng）装（zhuāng）或（huò） PCR 应（yīng）用（yòng）。 因此，需要通过 PCR 的加热循环（huán）以及在 37°C 下长期孵育来产（chǎn）生稳定的（de）液滴（dī）。 表面活（huó）性剂（jì）的选择至关重要，但选择（zé）油（yóu）同样重要，以确保可（kě）重复的实验以及单分散液（yè）滴群（qún）的生成和保存。

分别从三个方面测试液滴的稳定（dìng）性：一是把液滴重新注入到玻璃观察（chá）腔室内；二是经典（diǎn）的PCR热循环过（guò）程，循（xún）环过程30次（cì），每次热循（xún）环（huán）为98°C运（yùn）行（háng）10s, 50°C运行5s, 72°C运行10s；三是（shì）置（zhì）于37℃的培养箱内放置3天。对1万个（gè）液滴（dī）进行（háng）分析。

无论是在 Novec™ HFE 7500 还是 Fluo-Oil™ 135 中形成 FluoSurf™ 稳定的液滴，在 PCR 加热循（xún）环后或在 37°C 孵育 3 天后，液（yè）滴平均尺寸在生成时保持不变 [约 110μm (0.7nL)] 。此外，液滴种群仍然是单分散的。 根据（jù）统计（jì）分析，计算出在加热循环后，只有（yǒu） 5% 的整体液滴的大（dà）小（xiǎo）与（yǔ）平均初始液滴直径的差异超过 10%。

将氟（fú）化油从 Novec™ HFE 7500 切换到（dào） Fluo-Oil™ 135 对液滴稳（wěn）定性没有影响。

三、液滴（dī）内的分（fèn）子滞留

基于液滴（dī）的化学或生（shēng）化分析依赖于试剂在（zài）单个液滴中保持隔离。 泄漏到连续相（xiàng）和液滴之间的交换（huàn），即使很低（dī），也（yě）会（huì）影响结果的完整性，因此（cǐ），分子保留是选择氟化油时要考虑的重（chóng）要参数。 众所周知，氟（fú）化油会（huì）限（xiàn）制（zhì）液滴之间的分子（zǐ）交换，因此应验证切换（huàn）油的（de）影响。

同时生成两种油（yóu）包水乳液[“空”（负载 PBS）和“满”（负载荧光素）液滴]，一次使用 Novec™ HFE7500，然（rán）后使用 Fluo-Oil™ 135 作为连续相。 两种混合（hé）物，每一（yī）种都包含两个种群（qún），在 37°C 下（xià）孵育，并在不（bú）同的时（shí）间点拍摄照片。 使（shǐ）用 ImageJ 软件对液滴内荧光强度的演变进行（háng）了统计定量分析。

上图显（xiǎn）示了两个群体之间平（píng）均荧光强度差异的演变（染料加载和空液滴）以及在初始时（shí）间点（diǎn）和（hé） 48 小（xiǎo）时（shí）后相关的荧光和明场图片。

在 24 小时（shí）的过程中，两种氟化油产生的液滴中荧光素的泄漏率相似（约 15% 泄漏（lòu）），并（bìng）且在 Fluo-Oil™ 135 中产生液滴的情况下保（bǎo）持（chí）恒定 3 天。相反，在 24 小时（shí）后， Novec™ HFE7500 中（zhōng）液滴的泄漏继续减少并达到 30% 左右。 这种较长孵育时间的较差保留性能可归因（yīn）于后一种油的粘度略低，加（jiā）速了液滴之间更快的分子交换。

结论

对于基于液（yè）滴的微流体（tǐ）应用，从一种氟化油类型（xíng）切换到（dào）另一种类型可能会对微流体实（shí）验的过程产生重大影响，尤其是对液滴（dī）的有效生成产生重（chóng）大影响。 在氟油3M Novec™ HFE7500电子氟化液 和 氟油Fluo-Oil™ 135 的情况下，已（yǐ）证（zhèng）实更换这两种氟（fú）化油对实验条（tiáo）件（jiàn）和结果没有（yǒu）影（yǐng）响。 当使用 Fluo-Oil™ 135 作（zuò）为连续相（xiàng）时，甚至可（kě）以观察到荧光素在液滴内的更好保留。

氟化油Fluo-Oil™ 135 是用于液滴微流体应用（yòng）的（de）3M Novec™ HFE7500 氟油 的（de）有效替代品。